人骨肉瘤细胞

U-2 OS

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相关知识>>>>

基本共性:
　　1、所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质及糖被构成的生物膜，即细胞膜。
　　2、所有的细胞都含有两种核酸：即DNA与RNA。
　　3、作为遗传信息复制与转录的载体。
　　4、作为蛋白质合成的机器─核糖体，毫无例外地存在于一切细胞内，核糖体，是蛋白质合成的机器，在细胞遗传信息流的传递中起重要作用。
　　5、所有细胞的增殖都以一分为二的方式进行分裂。
　　6、能进行自我增殖和遗传
　　7、新陈代谢
　　8、细胞都具有运动性，包括细胞自身的运动和细胞内部的物质运动
　　注：病毒不含
传代培养中的细胞传代培养（subculture），当原代培养成功以后，随着培养时间的延长和细胞不断分裂，一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制，生长速度减慢甚至停止；另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。此时就需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养。这个过程就称为传代（passage）或者再培养（subculture）。对单层培养而言，80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段.
传代方法：
1．悬浮生长细胞传代
离心法传代：离心（1000转/分）去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。v2．半悬浮生长细胞传代（Hela细胞）
此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹打法使细胞从瓶壁脱落下来，进行传代。
3．贴壁生长细胞传代
采用酶消化法传代。常用的消化液有0.25％的胰蛋白酶液。
　　实验步骤
　　1．人无菌室之前用肥皂洗手，用75％酒精擦拭消毒双手。
　　2．倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否需要传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液置37℃下预热。
　　3．超净台台面应整洁，用0.1％新洁尔灭溶液擦净。
　　4．打开超净台的紫外灯照射台面20min左右，关闭超净台的紫外灯，打开抽风机清洁空气，除去臭氧。
　　5．点燃酒精灯；取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管；安上橡皮头；过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。
　　6．将培养用液瓶口用75％酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。
　　7．倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2—3mLHanks液洗去残留的旧培养基，或用少量胰酶涮洗一下。
　　8．每个大培养瓶加入1mL胰酶，小瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察，当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中。
　　9．加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基（7～10mL／大瓶，3～5mL／小瓶）制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖上瓶盖，适度拧紧后再稍回转，以利于CO2气体的进入，将培养瓶放回CO2培养箱。
　　10．对悬浮培养细胞，步骤7-9不做。可将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
细胞壁（Cell Wall）:
　　位于植物细胞的zui外层，是一层透明的薄壁。它主要是由纤维素和果胶组成的，孔隙较大，物质分子可以自由透过。细胞壁对细胞起着支持和保护的作用。